26 Feb
1. Identificación Fenotípica de Bacterias en Muestras Biológicas
Pasos básicos en un laboratorio microbiológico para la identificación fenotípica de bacterias:
- Verificar la correcta identificación de la muestra y la documentación adjunta.
- Confirmar la validez de la muestra para los estudios solicitados.
- Procesamiento de la muestra:
- Centrifugación: Para muestras líquidas con volumen superior a 1 ml.
- Homogenización: Para muestras sólidas o semisólidas, utilizando un mortero o un homogeneizador (Stomacher).
- Realizar extensiones y tinciones necesarias, si procede.
- Observación microscópica.
- Siembra.
2. Pretratamiento de la Muestra
El pretratamiento consiste en un procesamiento inicial, que puede incluir:
- Centrifugación: Para muestras líquidas (volumen > 1 ml).
- Homogenización: Para muestras sólidas o semisólidas, desmenuzándolas en un mortero estéril con caldo de cultivo o utilizando un homogeneizador (Stomacher).
- Realización de tinciones.
- Inoculación en medios de cultivo para su posterior incubación.
3. Obtención de Muestras de Orina
Las muestras de orina son susceptibles a la contaminación. La punción suprapúbica es la técnica que asegura la obtención de una muestra no contaminada.
4. Procedimiento para el Recuento de Colonias en Muestras de Orina (Urocultivo)
- Cargar el asa por inmersión en la orina.
- Realizar una siembra masiva en superficie por agotamiento del asa.
- Incubar a 35-37 ºC en aerobiosis durante 24-48 horas.
- Realizar el recuento y obtener el resultado.
- Si hay dos o más tipos de colonias, el resultado se considera no válido (probable contaminación). Se requieren aislamientos.
- Si se observa un solo tipo de colonia, se procede al recuento y se calcula el resultado, considerando el volumen sembrado.
5. Medio de Cultivo para Urocultivos
El agar CLED es un medio diferencial utilizado para el aislamiento, recuento e identificación presuntiva de microorganismos en orina. Permite el crecimiento de la mayoría de los patógenos urinarios e inhibe el crecimiento invasor de Proteus spp.
6. Laminocultivo
La siembra se realiza por inmersión directa del laminocultivo en la orina. Tras la incubación, se observa el crecimiento de bacterias gramnegativas y se obtiene un recuento estimado comparando el crecimiento en el medio CLED con patrones proporcionados por el fabricante.
7. Interpretación de Resultados de Urocultivo
Un cultivo positivo, junto con la detección de piuria y cilindros leucocitarios, indica una infección del tracto urinario.
8. Causas de Falsos Positivos y Negativos en Urocultivos
- Falsos positivos: Contaminación de la muestra (higiene insuficiente).
- Falsos negativos: pH urinario muy ácido, tratamiento con antibióticos o antidiuréticos.
9. Información sobre Disbacteriosis en Coprocultivos
Un coprocultivo proporciona información sobre el microorganismo predominante y las alteraciones de la microbiota intestinal.
10. Función del Medio Selenito F en Coprocultivos
El medio de selenito F inhibe las bacterias de la microbiota intestinal, facilitando el aislamiento de patógenos.
11. Microorganismo Habitual en Exudados Nasales
Staphylococcus aureus (S. aureus) es el microorganismo que se busca habitualmente en los estudios de exudados nasales. Es un coco grampositivo, con forma de racimo, inmóvil, de metabolismo fermentativo y anaerobio facultativo. Forma parte de la microbiota. Se diferencia de otros estafilococos mediante la prueba de la coagulasa (colonias amarillentas). Es la especie más virulenta.
12. Bacterias Estudiadas en Muestras Respiratorias
En muestras de esputo, aspirado traqueal, broncoaspirado o secreciones respiratorias, se estudian sistemáticamente:
- Streptococcus pneumoniae
- Haemophilus influenzae
- Moraxella catarrhalis
- Enterobacterias
- BGNF (Bacilos Gram Negativos No Fermentadores)
- S. aureus
13. Objetivos de los Métodos Cuantitativos y Cualitativos
- Método cuantitativo: Mide la cantidad de microorganismos presentes en la muestra.
- Método cualitativo: Observa la bacteria predominante.
14. Situaciones de Interés Clínico para el Estudio de Exudado Vaginal
- Infecciones (principalmente vulvovaginitis).
- Disbacteriosis.
- Detección de portadoras de Streptococcus agalactiae en mujeres embarazadas.
15. Detección de Lactobacillus spp. en Exudado Vaginal
La detección de Lactobacillus spp. no indica infección, ya que es una bacteria de la microbiota vaginal normal. Su reducción o desaparición sugiere disbacteriosis.
16. Importancia del Estudio de Exudado Vaginal y Rectal en Gestantes
Es crucial para detectar la presencia de Streptococcus agalactiae, que puede infectar al bebé durante el parto y causar problemas graves (parálisis cerebral, sordera, ceguera, meningitis).
17. Agentes Causantes de Infecciones Detectables en Exudado Vaginal
- Candida spp. (hongo)
- Trichomonas vaginalis (protozoo)
- Herpesvirus simple (virus)
18. Procesamiento de Hemocultivos
- Recepción de los frascos.
- Incubación a 35-37 °C en sistemas automáticos con monitorización continua.
- Notificación inmediata de resultados positivos.
- Procesamiento de frascos positivos:
- Tinción de Gram y estudio microscópico.
- Subcultivos en diferentes medios:
- Detección de bacterias aerobias: agar sangre o agar McConkey.
- Detección de anaerobias facultativas: agar chocolate.
- Detección de bacterias anaerobias: agar Schaedler.
- Detección de levaduras: medio para hongos (agar Sabouraud).
- Antibiograma preliminar.
19. Monitorización Continua de Hemocultivos
La monitorización continua durante la incubación permite informar rápidamente los resultados positivos para iniciar el tratamiento de forma temprana.
20. Criterios de Rechazo de Muestras de Hemocultivo
Los criterios de rechazo son extremadamente limitados debido a la importancia del diagnóstico de la bacteriemia.
21. Procedimiento Cualitativo para el Estudio de Catéteres
- Introducir la punta del catéter en un tubo con caldo de cultivo (BHI).
- Incubar y comprobar la positividad mediante turbidez.
- En los tubos positivos, realizar subcultivos en medios sólidos para identificación y antibiograma.
22. Principal Causa de Solicitud de Estudio Microbiológico de LCR
Las meningitis bacterianas agudas son la principal causa. Es una situación clínica urgente que requiere un diagnóstico rápido para iniciar el tratamiento. Agentes implicados según la edad:
- Menores de dos meses: E. coli, S. agalactiae, Listeria monocytogenes, Herpesvirus simplex tipo 2.
- Entre dos meses y diez años: H. influenzae, S. pneumoniae, Neisseria meningitidis, diversos virus.
- Adultos: Neisseria meningitidis, S. pneumoniae, Listeria monocytogenes, bacilos gramnegativos, diversos virus.
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