1. Introducción

El urocultivo es un examen de laboratorio que se realiza para detectar la presencia de bacterias en la orina. Es una herramienta fundamental para el diagnóstico y tratamiento de las infecciones del tracto urinario (ITU). Este documento proporciona una guía detallada sobre la interpretación de los resultados del urocultivo, los procedimientos para su realización y la importancia de la detección de sustancias antibacterianas residuales.

2. Métodos de Cultivo

2.1. Medios de Cultivo

La elección del medio de cultivo depende del tipo de bacteria que se busca identificar. Algunos ejemplos de medios de cultivo utilizados en el urocultivo son:

• Bacilos Gram negativos no fermentadores: Medio OF con glucosa, agar nitrato, agar TSI, agar LIA, agar citrato de Simmons, medio de movilidad, prueba de indol, prueba de oxidasa y agar Mac Conkey.
• Staphylococcus: Medio manitol salado, prueba de coagulasa, disco de colistina, agua oxigenada para la prueba de catalasa.
• Enterococcus: Agar bilis esculina, agar telurito de potasio, prueba de catalasa, agar nutritivo con cloruro de sodio 6,5%.

3. Interpretación de Resultados

3.1. Recuento de Colonias

Se realiza un recuento de colonias, cada colonia se contabilizará como equivalente a 1,000 o 200 UFC/mL de acuerdo al asa calibrada utilizada.

• Recuentos menores de 10,000 UFC/mL: Se consideran como contaminación y los cultivos son reportados como negativos.
• Recuentos entre 10,000 y 100,000 UFC/mL: Se consideran como sospechosos, se realizará la identificación y el antibiograma.
• Recuentos mayores de 100,000 UFC/mL: Se consideran como positivos y se realizará la identificación y el antibiograma.

Para recuentos mayores de 100,000 UFC/mL, no es necesario determinar el número exacto, pues su determinación no variará el manejo clínico. Los recuentos menores sí deben ser cuantificados.

3.2. Consideraciones Especiales

En muestras de mujeres, en las que se observe gran cantidad de células epiteliales, un recuento menor a 100,000 UFC/mL, menos de 5 leucocitos x campo en el sedimento y/o presencia de 3 tipos diferentes de colonias en el cultivo incluyendo la presencia de bacilos Gram positivos largos, se considerará como contaminación por flora vaginal, y se reportará como cultivo negativo y presencia de flora vaginal.

La presencia de más de tres colonias diferentes está asociado a contaminación, excepto en pacientes con presencia de sonda vesical, en los cuales es frecuente encontrar asociaciones de bacterias y hongos.

3.3. Resultados Falsos Positivos

• Orinas contaminadas con deposiciones o secreciones vaginales.
• Recolectores colocados durante más de 30-40 minutos.
• Demora en el envío de la muestra de orina al laboratorio, falta de refrigeración o uso de desinfectantes contaminados.
• Contaminación en el laboratorio.
• Tratamiento antibiótico reciente (la muestra debe tomarse por lo menos 5 días después de suspendido el antibiótico no profiláctico).
• Gérmenes de difícil desarrollo (formas L).
• Orina muy diluida o de baja densidad.
• El uso de desinfectantes locales.
• Obstrucción completa del lado infectado.

3.4. Resultados Falsos Negativos

• Tratamiento antibiótico reciente.
• Gérmenes de difícil desarrollo (formas L).
• Orina muy diluida o de baja densidad.
• El uso de desinfectantes locales.
• Obstrucción completa del lado infectado.

4. Procedimientos

4.1. Recolección de Muestras

Es fundamental que la recolección de la muestra de orina se realice de forma adecuada para evitar la contaminación. Se recomienda seguir las siguientes indicaciones:

• Higiene adecuada de la zona genital antes de la recolección.
• Recolección de la muestra de orina de la primera micción de la mañana.
• Utilizar un recipiente estéril para la recolección.
• Transportar la muestra al laboratorio en un plazo máximo de 2 horas.

4.2. Cultivo

Una vez que la muestra de orina llega al laboratorio, se realiza el cultivo en un medio de cultivo adecuado. El cultivo se incuba a 35°C durante 18-24 horas.

4.3. Identificación de Bacterias

Si se observa crecimiento bacteriano en el cultivo, se procede a la identificación de la bacteria mediante pruebas bioquímicas y/o pruebas de sensibilidad a los antibióticos.

5. Observaciones

• Los medios de cultivo deben estar a temperatura ambiente y la superficie debe estar seca.
• Los recuentos no se aplican a muestras de orina obtenidas por punción vesical, en estos casos cualquier recuento es considerado como significativo.
• Con relación a urocultivos condicionales: la ausencia de leucocitos no se considerará como indicación para no realizar un urocultivo.

6. Presencia de Sustancias Antibacterianas

6.1. Propósito

El propósito es determinar la presencia de sustancias antibacterianas residuales en orina. Este procedimiento se aplica en todos los casos en los que se solicite urocultivo.

6.2. Equipos y Materiales

• Discos de papel filtro Whatman N° 3 estériles de 6 mm de diámetro.
• Placa de Agar Mueller Hinton 100 x 15 mm. o Tubo con caldo Mueller Hinton x 2 mL.
• Alicate sacabocados para 6 mm de diámetro.
• Cepa de Bacillus subtilis ATCC 6633.

6.3. Procedimiento

• Hacer una suspensión de Bacillus subtilis en un tubo de caldo tripticasa soya o caldo Mueller Hinton que sea similar al tubo 0,5 de la escala de Me Farland.
• Sembrar la placa de agar Mueller Hinton con la suspensión de bacterias de manera similar a un antibiograma.
• Tomar con la pinzas un disco de papel filtro y sumergirlo en la orina.
• Colocarlo en la placa sembrada según la plantilla.
• La placa será incubada a 35°C por 18 horas.
• Se observará la presencia de un halo de inhibición alrededor del disco con la orina.

6.4. Interpretación

• Cualquier diámetro de halo se considerará como prueba positiva.
• La ausencia de halo se considera como prueba negativa.
• El resultado se informa como “Sustancias antibacterianas residuales: Positivo o Negativo”.

7. Antibiograma

7.1. Definición

El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibióticos.

7.2. Procedimiento

En el antibiograma, las placas de cultivo o placas de Petri se pueden confeccionar con unos aros embebidos en diferentes antibióticos. Si el gérmen que crece por el resto de la placa no lo hace alrededor del aro con un determinado antibiótico, es decir, se inhibe su crecimiento gracias a ese antibiótico, se forma un halo a su alrededor limpio de gérmenes.

r limpio de gérmenes.

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